thermofisher赛默飞qubitflex荧光分光光度计仪器标准品错误

“Qubit Flex 仪器标准品错误"这个提示，通常表明仪器在校准过程中，检测到的标准品荧光信号不在预期范围内。

不用太担心，这不是仪器坏了，绝大多数情况都可以通过以下步骤来排查和解决。

一、检查关键数值与硬件

1、查看原始荧光值 (RFU)：在仪器上找到“Check Standards"或“Check Calibration"功能。

（1）对于核酸定量：标准品2 (Standard 2) 的荧光值，应至少是标准品1 (Standard 1) 的 10到50倍。

（2）对于蛋白定量：标准品3 (Standard 3) 的荧光值应约为标准品2 (Standard 2) 的 2倍。

（3）如果荧光值不满足上述关系，说明标准品本身或配制过程可能有问题。

2、检查仪器光源：打开仪器盖子，运行一次校准，观察样品槽内是否有红光或蓝光闪烁5次。如果没有，说明仪器光路可能存在问题，需要联系售后。

二、检查操作流程

1、确认标准品与样本的配制：检查是否严格按照说明书操作。例如，标准品通常需要将 10 µL 的标准品加入到 190 µL 的工作溶液中。同时，请确保标准品与样品使用的是同一批工作液。

2、核对试剂盒与程序：确认仪器上选择的程序与你所用的Qubit检测试剂盒匹配。

3、检查标准品与试剂盒有效期：Qubit试剂盒自收到之日起，通常稳定至少6个月。如果试剂盒已过期（比如超过一年），或怀疑RNA标准品降解，建议更换新的试剂盒。

4、检查检测管：确保使用的是光学透明的专用检测管。同时，保证管外壁清洁干燥，且管内液体体积至少为200 µL。

三、排查环境与操作细节

1、温度控制：Qubit检测对温度敏感。确保所有试剂（缓冲液、染料）和样本都处于室温（~25°C）。刚从4°C冰箱取出的缓冲液，即使在室温放置2-3小时也可能仍未达到室温。

2、避免样本过热：刚从离心机取出的样本，或在仪器内放置过久、反复读取的样本，都可能因温度升高导致信号减弱。如需多次读取，应将检测管取出，在室温下平衡至少30秒再测。

3、检查样本浓度：查看原始荧光值，确认样本的荧光值是否落在标准品的荧光值之间（或略高于最高标准品）。如果不在范围内，仪器会提示“OUT OF RANGE"，此时需要对样本进行稀释或调整上样体积。

4、交叉污染：Qubit检测非常灵敏，即使是上一个样本的微小残留都可能导致错误。建议每次使用新的检测管，并确保管外壁清洁干燥。