赛默飞QubitFlex荧光计读数随时间降低

使用Qubit Flex时读数随时间逐渐降低，最常见的原因是检测管在仪器内持续受热。荧光信号对温度很敏感，温度升高会使信号减弱。

一、避免样品在仪器内过热

1、避免反复读取：读数时，检测管在仪器内会被加热，导致信号下降。

2、正确做法：如需对同一管样品进行多次读取，应将检测管从仪器中取出，在室温下放置至少30秒，待其冷却至室温后再重新测量。

3、缩短上机时间：上机前再拿起管子，尽量缩短手持时间（手温也会加热样品）。

二、确保试剂与样品处于正确的温度

1、室温平衡：确保缓冲液、Qubit试剂和样本都处于室温（~25°C）。刚从4°C冰箱取出的缓冲液，即使在室温放置2-3小时，内部可能依然偏冷。

2、避免过热：刚从离心机取出的样品，也可能温度偏高。

三、控制好孵育与检测时间

1、孵育时间：核酸样品需孵育2分钟，蛋白质样品需孵育15分钟。孵育时间不足可能导致信号不稳定。

2、检测时限：预混好的样品需避光保存，并最好在3小时内完成检测。

四、其他注意事项

1、核对程序与试剂盒：确保仪器上选择的程序与所用试剂盒匹配。

2、检查试剂与标准品：确保试剂在有效期内（通常为6个月），并正确避光保存。

3、检查检测管：使用试剂盒推荐的、光学透明的检测管，确保管外壁清洁干燥，管内无气泡。

五、Qubit Flex的高光稳定性

值得一提的是，Qubit Flex仪器本身具有很高的光稳定性。相关资料显示，其荧光信号在连续9次读取后下降小于0.3%，40次后也仅下降小于2.5%。因此，读数下降并非仪器性能问题，主要是由温度变化导致的。