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技术文章

赛默飞NanoDrop Ultra C紫外分光光度样品与参比液弄反

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对于NanoDrop这类超微量分光光度计,“样品与参比液弄反"通常指在空白校正(Blank)步骤中,误将样品溶液当作空白液进行校正。这会导致后续所有测量数据的基准错误,结果毫无意义。


一、错误的后果:数据不可用

空白校正的目的是建立一个“零"基准,以扣除溶剂和仪器本身的背景信号。如果用样品液进行空白校正:

1、样品信号被错误扣除:仪器会将样品本身的信号当作“背景"扣除。这意味着后续测量同种样品时,得到的将是一个被严重削弱甚至为负值的错误读数。

2、所有数据失效:一旦用错了空白液,后续测量的所有数据(浓度、纯度比值等)都将失去任何参考价值,必须全部作废。


二、解决方案:重新进行正确的空白校正并测量

发现错误后,正确的做法就是抛弃错误数据,重新测量。

1、清洁上下基座:使用无尘软布(如Kimwipes),蘸取少量去离子水或70%乙醇,单向擦拭上下基座,并让其干燥。

2、使用正确的空白液重新校正:

(1)在下基座滴加 1-2 μL 与样品一致的空白液(如TE Buffer)。

(2)放下检测臂,点击软件中的 “Blank" 按钮。

(3)完成后,抬起检测臂,用干净的无尘布擦净基座。

3、重新测量所有样品:完成正确的空白校正后,再点样测量你的所有样品。


三、如何避免再次发生

1、养成良好习惯:操作前,务必在心理或实验记录上明确区分“空白液"和“样品液"。可以用不同颜色的离心管或标记来区分。

2、善用自动功能:NanoDrop Ultra C具备“自动空白检测 (Auto-Blank)"功能。开启后,放下检测臂仪器便会自动执行空白校正,能有效避免人为错误。

3、注意溶剂一致性:确保空白溶液与样品溶解液一致。每次更换缓冲液后,都必须用对应的新空白液重新进行空白校正。

4、利用内置诊断:NanoDrop Ultra C的高分辨率摄像头会自动拍摄液柱状态,Acclaro技术也能在样品异常时发出预警,注意观察这些提示。

TEL:18016231680

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