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遇到BioRad Mini-PROTEAN Tetra(1658004)电泳仪在运行中电流突然下降,先别着急。这通常不是仪器损坏,而是电泳体系电阻突然增大导致的。在恒压模式下,根据欧姆定律(I=U/R),电阻(R)增大,电流(I)自然会下降。
请按以下顺序,从常见的原因开始排查:
一、立即检查(安全起见,先暂停电泳)
1、观察是否有气泡断开电路?
(1)现象:电极丝上或凝胶底部附着了大气泡,特别是铂金电极丝与缓冲液之间。
(2)对策:断电后,轻敲电泳槽外壁,或用移液管吹出气泡。如果是凝胶底部与下槽缓冲液之间有气泡(跑一条带后突然发生),说明玻璃板底部密封不严,内槽缓冲液漏光,需要重新加满内槽液。
2、检查缓冲液液面
(1)内槽(阴极):液面必须淹没短板玻璃的上沿。如果液面下降,说明内槽漏液→补充缓冲液至正确刻度。
(2)外槽(阳极):液面是否过低?如果外槽液面低于玻璃板下沿,电路也不通。
3、检查缓冲液状态
(1)是否使用过多次? Tris-甘氨酸缓冲液一般跑3次左右即需更换。多次使用后离子耗尽,导电能力急剧下降→更换新鲜缓冲液(内、外槽都换)。
(2)是否配错或稀释? 比如记成了5x或10x储存液使用?→重新配制正确浓度的1x工作液。
二、如果以上都正常,检查硬件
1、检查电极插头和导线
(1)红黑插头是否松动或氧化?插拔几次,确保插入电源接口。
(2)电源线是否有折断(尤其插头根部)?可用万用表测量通断。
2、检查铂金电极丝
观察电极芯(红黑两面的金属丝)是否断裂或严重腐蚀?如果断了,需要更换电极芯组件(1658035/1658036)。
三、根据具体实验情况判断
1、如果是蛋白电泳,刚进入分离胶时:
这是正常现象!当样品从浓缩胶(低pH,高Cl⁻)进入分离胶(高pH,低Cl⁻,甘氨酸根开始移动),电阻会生理性增大,电流会缓慢下降20-40%,然后稳定。无需处理,继续跑完即可。但如果下降超过80%(比如从150mA降到20mA),则按上述排查。
2、如果是核酸琼脂糖凝胶电泳用此设备?(虽然不常见)
检查TBE或TAE缓冲液浓度是否正确。如果用了去离子水,电流会为零。
四、现象 → 可能原因 → 解决方案
1、电流骤降为0或极低
原因:电路断路
解决办法:
(1)内/外槽液面过低 → 加液
(2)电极插头松动 → 插紧
(3)电极丝断裂 → 更换
2、电流缓慢下降30-50%
原因:进入分离胶阶段(正常)
解决办法:无需处理,继续运行
3、电流逐步下降至接近0
原因:缓冲液耗尽或稀释
解决办法:换新缓冲液
4、电流不稳定,时有时无
原因:气泡阻断或接触不良
解决办法:排泡,清理插头触点
五、应急处理流程
电流突然下降
暂停电泳 → 检查:
1、内槽液面? → 液面下降则补充
2、内槽底部有无漏液? → 漏液则拆开重装玻璃板(确保密封条干净、无破损)
3、外槽液面? → 过低则补充
4、新旧缓冲液? → 旧液则更换
5、气泡? → 排泡
6、插头连接? → 重插
7、电极丝断裂? → 更换电极芯