biorad伯乐Gene Pulser Xcell技术参数使用说明书

这是一份详细、结构化且面向用户操作的 伯乐Gene Pulser Xcell 电穿孔系统技术参数与使用说明手册。

一、伯乐Gene Pulser Xcell 电穿孔系统概述

Gene Pulser Xcell 是一款全功能、模块化的实验室电穿孔仪，适用于细菌、酵母、哺乳动物细胞及其他真核细胞的转化/转染。其核心特点是 指数衰减波 电击，通过精确控制电压、电容和电阻参数，在细胞膜上形成可逆的瞬时孔隙，使外源DNA、RNA或其他分子高效进入细胞。

二、伯乐Gene Pulser Xcell 电穿孔系统组件

1、主机: 包含控制界面、电容模块和高压电源。

2、电击槽: 可容纳1-4mm间隙的电击杯。

3、专用电击杯: 一次性或可重复使用（需清洁消毒），规格通常为1mm（哺乳动物细胞）、2mm（通用）、4mm（细菌）。

4、PC连接软件（可选）: 用于远程控制和数据管理。

三、伯乐Gene Pulser Xcell 电穿孔系统核心技术参数

类型：电转化仪

尺寸（长x宽x高）：31x30x14 cm

重量：6.6 kg

电源：240W（在短时间充电时）

输出：电压： 10–3,000 V

电容：10–500 V，25–3,275 µF，增量为 25 µF

样品电阻：低 20 Ω（10–2,500 V 时）低 600 Ω（2,500–3,000 V 时）

测量范围：从原代细胞和干细胞到细菌和酵

电阻（并联）：50–1,000 Ω，增量为 50Ω，正无穷大

连续工作时间：8小时

环境温度：温度 0–35℃，湿度 0–95%

产地：新加坡

四、伯乐Gene Pulser Xcell 电穿孔系统标准操作流程

A、实验前准备

1、仪器准备: 连接电源，打开主机电源开关。仪器进行自检。

2、参数预设: 根据待转染细胞类型，参考附录的推荐起始参数或已发表的文献，在主机面板上设置预期的 电压 (V)、电容 (C) 和电阻 (R)。

3、样品与电击杯准备:

将待转染细胞与DNA/分子混合于适当的缓冲液中（如PBS、电转专用缓冲液）。保持样品和电击杯低温（冰上） 以增加细胞存活率。

将混合液转移至对应间隙的电击杯（例如，哺乳动物细胞常用1mm杯），确保液体覆盖电极底部，且无气泡。

擦干电击杯外壁，将其稳妥放入电击槽。

B、电击过程

1、安全警告: 确保电击槽盖紧闭（安全联锁装置），仪器显示“READY"。

2、执行电击: 同时按下电击槽两侧的 “Pulse" 按钮（双手操作安全设计），直至听到蜂鸣声并看到电击完成提示。

3、记录结果: 屏幕将显示 实际输出电压 和关键的 时间常数 (τ)。记录这些数据对优化实验至关重要。

C、电击后处理

1、立即取出电击杯，向杯中加入适量的恢复培养基或缓冲液，温和吹打混匀后，将细胞转移至培养容器中。

2、根据细胞类型，进行后续培养（如，在37°C， 5% CO₂培养箱中恢复培养）。

五、全注意事项

1、高压危险！ 仪器内部和电击杯中存在致命高压。切勿在仪器通电或电击后立即打开电击槽盖或触摸电击杯内部电极。等待至少10秒，或确认屏幕无高压提示。

2、生物危害: 电击杯和样品可能含有生物危害物质。处理时需佩戴手套，并按生物安全规程处置废弃物。

3、电弧预防: 确保电击杯外壁干燥，电极清洁无腐蚀，样品量足够且无气泡，以防止产生电弧损坏仪器和样品。

4、专用电击杯: 仅使用伯乐原厂或认证兼容的电击杯，不兼容的杯子可能导致参数不准或产生电弧。