伯乐MicroPulser 电穿孔仪技术参数使用说明书

这是一份详细的、结构化的伯乐MicroPulser电穿孔仪技术参数及使用说明综合指南。

一、伯乐MicroPulser 电穿孔仪概述

MicroPulser是伯乐（Bio-Rad）公司推出的一款台式、紧凑型电容式电穿孔仪。它专为高效的细菌转化（尤其是大肠杆菌）而优化设计，同时也可用于酵母、分枝杆菌等微生物的电转化。其核心特点是操作简单、预设程序丰富、重复性好。

二、伯乐MicroPulser 电穿孔仪技术参数

类型：电转化仪

尺寸（长x宽x高）：29x21x8 cm

重量：2.9 kg

电源：240W（在短时间充电时）

输出：电压： 100–120 V 或 220–240 V

预设程序：5 种杆菌，5 种真菌

工作温度：3.5–35°C

输出电压和脉冲时间调节：电压可调范围为 200–3,000 V，精度为 10 V；5 ms 默认值，或 1–4 ms，精度 0.1 ms。

输出:波型：带 RC 时间常数的衰变或斜截衰变指数波型MAX输出

电压和电流 3,000 V 峰值，>600 W 负载，峰值MAX电流 100 A

产地：新加坡

三、伯乐MicroPulser 电穿孔仪控制面板与组件

1、电源开关：位于仪器背面。

2、显示屏：LED显示窗口，显示选择的程序代码和状态。

3、程序选择按钮 (P1-P7)：按下选择对应的预设程序。

4、电阻/时间常数旋钮：旋转选择 Low, Med, High, ∞ 档位。

5、脉冲按钮 (红色Pulse按钮)：按下以释放电脉冲。按钮上方的指示灯在充电和放电时会亮起。

6、电击杯槽：容纳1 mm电击杯的插槽。

7、安全盖：带互锁开关的透明盖，必须盖紧才能工作。

四、标准操作流程

1、选择程序：按下 P1, P2 或 P3 按钮（根据所用感受态细胞类型选择，常用P1或P2）。显示屏显示相应代码。

2、设置电阻：将电阻旋钮旋至 “High" 位置（这是大多数大肠杆菌转化如DH5α的标准设置，提供~2.2 ms时间常数）。

3、放入样品：用吸水纸擦干电击杯外壁，迅速放入仪器电击杯槽内。

4、启动脉冲：用力盖紧安全盖，直到听到“咔哒"声，表示互锁装置激活。立即按下红色的 “Pulse" 按钮。你会听到一声蜂鸣，同时指示灯闪烁。

5、取出样品：脉冲结束后（<1秒），立即打开盖子，迅速取出电击杯。

6、细胞复苏：立即向电击杯中加入 1 ml 预热的SOC或LB复苏培养基，用移液器轻轻吹吸混匀。将混合液转移至无菌离心管中。

7、培养与涂板：将离心管置于37°C摇床，150-200 rpm复苏培养45-60分钟。取适量菌液涂布在含相应抗生素的平板上，倒置培养过夜。

五、重要注意事项与维护

1、安全重要性：

确保电击杯外壁和样品槽内干燥，以防短路和电弧。

放电时切勿触碰电击杯或打开安全盖。

只能使用伯乐原厂或认证的1 mm电击杯。

2、操作关键：

所有组件（细胞、DNA、电击杯）必须预冷（冰上操作）。

细胞与DNA混合物中应避免高浓度盐分，否则会引起电弧。推荐使用超纯水或TE buffer稀释DNA。

从冰上取出到放电的间隔应尽可能短（<30秒）。

脉冲后立即进行复苏，这对细胞存活重要。

3、故障排除：

无脉冲/指示灯不亮：检查电源、安全盖是否盖紧、电击杯是否放好。

产生电弧（火花）：检查样品是否有盐分或杂质、电击杯是否洁净干燥、电击杯是否破损。

转化效率低：优化DNA用量和纯度；尝试不同的电阻设置（如从High调至Med）；检查感受态细胞质量。

4、洁与维护：

关闭电源并拔掉插头后进行清洁。

用蘸有70%乙醇的软布擦拭仪器外部和电击杯槽内部。切勿让液体渗入仪器内部。

保持仪器在干燥清洁的环境中。