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伯乐 GelDoc XR+ 凝胶成像系统使用说明书。本说明将包含系统介绍、快速上手指南、详细操作流程、软件使用要点以及维护与故障排查。
一、伯乐 GelDoc XR 凝胶成像系统概述
GelDoc XR+ 是一款高性能的凝胶成像系统,用于对蛋白质凝胶、核酸凝胶、印迹膜等进行高灵敏度、高分辨率的图像采集和分析。其核心特点包括:
1、高分辨率 CCD 相机:提供清晰的图像。
2、专业级光源:包含透射紫外(UV)、透射白光、侧白光/蓝光(用于染色凝胶如考马斯亮蓝、SYBR® 安全染料等)。
3、暗箱式设计:隔绝环境光,保证成像质量。
4、集成软件:标配 Image Lab™ 软件,用于图像采集、分析和定量。
二、伯乐 GelDoc XR 凝胶成像系统主要组件
1、主机暗箱:包含内部样品台、镜头、滤镜轮和光源。
2、高清 CCD 相机:安装在暗箱顶部。
3、触摸屏控制面板:位于暗箱前方,用于快速控制光源、镜头对焦和初步预览。
4、电脑工作站:预装 Image Lab 软件。
5、专用紫外防护眼镜:使用紫外光源时必须佩戴!
6、样品托盘:用于放置凝胶、膜或培养皿。
三、伯乐 GelDoc XR 凝胶成像系统快速入门
目标: 快速获取一张 EB 染色的 DNA 凝胶图像。
1、准备与放置样品:
(1)打开暗箱门,将染好 EB 的琼脂糖凝胶放在样品托盘中部。
(2)关闭暗箱门。
2、使用触摸屏预览和对焦:
(1)在触摸屏上,选择 “UV" 光源图标。
(2)点击 “Live Preview" (实时预览)按钮。系统会打开紫外灯,并在触摸屏上显示图像。
(3)使用 “Focus" (对焦)区域的 “+/-" 按钮手动调节焦距,直至条带清晰。
(4)点击 “Stop Preview" 停止预览。
3、在电脑软件上采集图像:
(1)在电脑上打开 Image Lab 软件。
(2)点击主界面左上角的 “Capture" (采集)按钮。
(3)在弹出窗口中选择合适的预设(如 “Ethidium Bromide Gel")。
(4)点击 “Start Capture"。图像会自动采集并显示在软件主窗口中。
四、详细操作流程
1、步骤 1:开机
(1)打开电脑,进入操作系统。
(2)打开凝胶成像系统主机背面的电源开关(暗箱右侧或后方)。
(3)启动 Image Lab 软件。软件会自动与相机连接。
2、步骤 2:放置样品
(1)戴上紫外防护眼镜(如需使用紫外光)。
(2)向上轻提并打开暗箱门。
(3)将样品(凝胶、膜等)平放在样品台中心。对于小胶,可调整样品托盘位置。
(4)确保暗箱门关闭。
3、步骤 3:选择成像方法(预设)
(1)Image Lab 软件的核心是 “Protocols"(预设)。它自动配置了光源、滤镜、曝光时间、光圈等所有参数。
(2)在 “Capture" 窗口左侧,点击 “Select Protocol"。
(3)从列表中选择接近你样品的预设:
Ethidium Bromide Gel:用于EB染色的核酸凝胶。
SYBR® Safe Gel:用于SYBR安全染料的凝胶(使用蓝光或白光)。
Stain-Free Gel:用于伯乐荧光免染胶。
Coomassie Blue Gel:用于考马斯亮蓝染色的蛋白胶(使用白光)。
Chemiluminescence:用于化学发光膜(关闭所有光源,长时间曝光)。
Colorimetric:用于比色法膜(如NBT/BCIP,使用白光)。
Multicolor Fluorescence:用于多重荧光。
4、步骤 4:预览、对焦与调整
(1)预览:点击 “Live Preview" 按钮,软件会按预设打开光源并显示实时图像。触摸屏也可进行此操作。
(2)对焦:
手动:使用软件界面或触摸屏上的对焦按钮。
自动:点击软件中的 “Auto-Focus" 按钮。
(3)调整曝光:
如果条带过亮/过暗,在预览模式下,调整 “Exposure Time"(曝光时间)。软件通常有 “Auto-Expose"(自动曝光)按钮,点击后可自动计算合适时间。
也可手动调整光圈(Aperture)或相机增益(Gain),但初学者建议使用自动或仅调曝光时间。
5、步骤 5:采集与保存图像
(1)确认预览图像满意后,点击 “Start Capture"(开始采集)。
(2)采集完成后,图像会出现在软件主窗口的 “Image Window"(图像窗口)中。
(3)立即保存:点击工具栏的软盘图标 “Save",或按 Ctrl+S。
建议格式:原始数据保存为 .scn 格式(Image Lab 专用,包含所有数据)。同时可另存为 .tiff(用于出版,无压缩)或 .jpg(用于报告)。
五、 Image Lab 软件基础分析功能
1、泳道与条带分析(适用于凝胶):
(1)点击工具栏的 “Lanes and Bands"(泳道和条带)图标。
(2)软件会自动识别泳道(可手动调整)。点击 “Bands" 标签,它会自动检测条带。
(3)查看右侧的 “Quantity Table"(定量表),可看到每个条带的相对分子量(MW)、相对浓度(基于标准曲线或相对强度)。
2、分子量标准曲线:
(1)在泳道分析界面,右键点击已知分子量标准的泳道,选择 “Lane Standard"。
(2)在弹出的对话框中,输入各条带对应的分子量值。
(3)软件会自动生成标准曲线,并据此计算未知样品的分子量。
3、图像调整:
(1)使用 “Adjust Image"(调整图像)工具可以调整图像的亮度、对比度、饱和度和锐度。
(2)重要:用于发表的图像,所有调整必须在图注中说明。定量分析使用原始图像。
六、安全注意事项与日常维护
1、安全性
(1)紫外光危害:使用紫外光源时,必须佩戴随机附带的紫外防护眼镜,并避免皮肤直接暴露在紫外灯下。预览时尽量关闭观察窗。
(2)化学品污染:处理含有染料的凝胶时,需戴手套。避免EB等有害物质污染样品台或暗箱内部。
(3)电气安全:保持设备干燥,清洁前断开电源。
2、日常维护:
(1)清洁样品台/托盘:使用后,用柔软的湿布蘸取温和清洁剂擦拭,再用清水擦拭干净。
(2)清洁暗箱内部:定期用吹气球或软毛刷清除灰尘。
(3)清洁观察窗/紫外防护板:使用镜头纸或软布蘸取玻璃清洁剂轻轻擦拭。
(4)相机镜头:非专业人员请勿自行拆卸清洁。如有灰尘,联系工程师。
3、关机顺序:
(1)关闭 Image Lab 软件。
(2)关闭电脑。
(3)关闭凝胶成像系统主机背面的电源开关。
最后建议:
详细手册:对于高级功能和软件设置,请务必参阅随机的 《Image Lab 软件用户指南》 PDF。
技术支持:如遇无法解决的问题,请联系伯乐(Bio-Rad)当地技术支持部门,并提供仪器序列号和软件版本号。