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Mini Trans-Blot® 电泳转印槽的使用说明书。这是一个经典和常用的设备。可以为您整理一份详细、准确的操作步骤、关键注意事项和资源获取指南,其内容基于该设备的说明书,能确保您安全正确地使用。
一、伯乐Mini Trans-Blot电泳转印槽核心组件清单
1、缓冲液槽及带有安全联锁插孔的槽盖。
2、转印夹:黑色面为阴极(-),透明/白色面为阳极(+)。通常配1-2个。
3、海绵垫:厚约1cm,用于产生均匀压力。
4、滤纸:与凝胶尺寸相近,用于传导电流和缓冲液。
5、冰盒/冷却芯(可选配件):用于转印时降温。
6、电源连接线。
二、伯乐Mini Trans-Blot电泳转印槽转印操作步骤(以转印至PVDF膜为例)
1、组装“三明治"
口诀:黑负白正,从黑到白
在盛有缓冲液的浅盘中进行,确保所有组件浸湿并逐层排尽气泡。
(1)打开转印夹,黑色(阴极)面朝下放置。
(2)在黑色夹板上依次平铺:
1块海绵垫
2层滤纸
(3)极性不能错:牢记“黑对黑,白对红"(转印夹黑面对槽黑极,白面对红极)。接反会导致蛋白被转出膜外。
(4)膜的选择与处理:PVDF膜必须用甲醇激活;NC膜亲水,无需激活但机械强度较差。
(5)条带扭曲/变形:通常是“三明治"组装不平、海绵或滤纸老化、或冷却不均导致。
(6)转印效率低:
小分子量蛋白被转穿:缩短转印时间或降低电流。
大分子量蛋白转印不干净:延长转印时间,或在缓冲液中加入0.1% SDS 以提高渗透性。