BioRad伯乐CFX DUET实时荧光定量PCR仪做实验用的是哪些试剂耗材？

伯乐CFX DUET是一款性能稳定、应用广泛的实时荧光定量PCR仪。要完成一个完整的qPCR实验，您需要准备以下三大类物品：

一、伯乐CFX DUET实时荧光定量PCR仪核心试剂

这部分是进行PCR扩增和荧光信号检测所必需的生化试剂。

1、qPCR预混液

这是最关键的试剂，通常是一个包含热启动Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl₂ 和优化缓冲液的即用型主混合物。

伯乐自有品牌：Bio-Rad的SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix 是常用的选择之一，它对SYBR Green染料进行了专门优化，具有高效率和特异性。

其他兼容品牌：只要是为qPCR设计的预混液，并且荧光染料与仪器光学检测系统兼容（如SYBR Green, FAM, HEX, TAMRA, ROX, Cy5等），都可以使用。例如，TAKARA、Thermo Fisher等公司的同类产品也广泛使用。

2、荧光检测试剂

染料法：如果您使用SYBR Green 方法，荧光染料通常已经包含在上述的预混液中。

探针法：如果您使用TaqMan 或其它水解探针法，您需要额外购买和添加设计好的特异性荧光探针。

3、模板DNA/cDNA

您要检测的样品核酸，如从样本中提取的基因组DNA或由RNA反转录得到的cDNA。

4、引物

针对您目标基因特异性设计的上游和下游引物。

5、无核酸酶水

用于稀释和调整反应体系体积。

二、伯乐CFX DUET实时荧光定量PCR仪核心耗材

这部分是盛放反应液并进行实验的物理载体。

1、qPCR反应板/八联管

96孔板：这是最标准和常用的耗材。CFX DUET适配标准的96孔PCR板。

材质：通常为聚丙烯，光学透明或带有透明光学膜盖。

颜色：常见的是白色，因为白色能反射荧光，减少孔间串扰，提高信噪比。透明板也可使用，但在信号较弱时可能不如白色板。

八联管及管架：如果您处理的样本量少，使用八联管更加灵活经济。您需要相应数量的单个管盖或透明光学封板膜来密封。

2、光学封板膜

必需的耗材！用于密封96孔板或八联管。

要求：必须是光学级的透明密封膜，以保证透光性，并且能牢固粘附，防止实验过程中液体蒸发和产生冷凝水。不能使用普通的封口膜。

三、总结清单

1、2x qPCR PreMix

体积：10 µL

备注：例如 SsoAdvanced SYBR Green Supermix

2、正向引物

体积：0.5-1 µL

备注：根据预混液说明确定终浓度

3、反向引物

体积：0.5-1 µL

备注：根据预混液说明确定终浓度

4、模板DNA

体积：1-5 µL

备注：体积取决于浓度，通常建议在100pg-100ng之间

5、无核酸酶水

体积：补足至 20 µL

备注：计算并加入，使总体积为20µL

6、耗材：

96孔qPCR板 或 八联管 + 管架

光学透明封板膜

无菌、无核酸酶带滤芯吸头（不同量程）