BioRad伯乐CFX Opus 96实时荧光定量PCR仪可以做的实验有哪些？

伯乐（Bio-Rad）的 CFX Opus 96 是一款高性能、高通量的实时荧光定量PCR仪。核心功能是进行qPCR 实验，但凭借其精确的温控、灵敏的光学检测系统和灵活的软件，它可以完成多种基于PCR实验。以下是CFX Opus 96可以进行的主要实验类型，从常见到专业的：

一、伯乐CFX Opus 96实时荧光定量PCR仪基础应用

1、基因表达分析

这是广泛的应用。 通过检测样本中特定mRNA的量，来研究基因在何种条件下、在哪些组织或细胞中表达。

应用实例：研究癌症组织中某个癌基因的表达是否上调；比较药物处理前后细胞中炎症因子基因的表达变化。

2、病原体检测与鉴定

高灵敏度和特异性使其成为检测病毒、细菌、真菌等病原体的黄金标准。

应用实例：新冠病毒、流感病毒、HPV病毒分型、食品安全中的致病菌检测等。

3、转基因成分检测

定性或定量检测食品、饲料或植物样本中是否含有转基因成分。

4、SNP分型

检测单核苷酸多态性，用于基因突变分析、药物基因组学、遗传病筛查等。通常需要使用特定的探针或染料。

二、伯乐CFX Opus 96实时荧光定量PCR仪高级应用

1、数字PCR

注意：CFX Opus 96本身是一台qPCR仪。但要进行定量的数字PCR，需要额外配备伯乐的QX200 Droplet Digital PCR系统。流程是：先用QX200系统生成微滴并完成PCR扩增，然后将96孔板放到CFX Opus 96上进行终点荧光检测，最后通过软件分析每个微滴的荧光信号，实现定量。所以，它可以作为ddPCR工作流中的一个组成部分。

2、高分辨率熔解曲线分析

CFX Opus 96具有出色的熔解曲线分析功能，可以：

基因分型：区分不同的基因型，如突变型、野生型和杂合型。

突变扫描：检测PCR产物中是否存在未知的突变或单碱基差异。

甲基化分析：结合重亚硫酸盐处理，可以用于DNA甲基化水平的研究。

3、microRNA表达分析

由于miRNA分子非常短，需要特殊的茎环法引物或加尾法来进行逆转录和qPCR。CFX Opus 96的高灵敏度使其非常适合检测这种低丰度、小片段的RNA。

4、多重PCR

在一个反应管内同时检测多个目标基因。这要求仪器具有多个、且光谱不重叠的荧光通道。CFX Opus 96通常配置有3-5个荧光通道，可以轻松进行双重、三重甚至更多重的qPCR实验，大大提高效率和节省样本。

三、总结

伯乐CFX Opus 96 PCR仪的核心能力可以概括为：

1、高精度定量：不仅能判断“有或无"，还能精确知道“有多少"。

2、高灵敏度：可以检测极微量的核酸样本。

3、高特异性：通过探针法和熔解曲线分析，确保检测结果的准确性。

4、高通量：96孔板格式适合中等通量的筛选和验证实验。

5、多功能性：通过不同的实验设计和试剂盒，可以实现从基础的基因表达到高级的突变分析等多种应用。

在选择实验方案时，您需要根据具体的研究目标，搭配相应的试剂盒、引物和探针，并利用CFX Maestro软件进行实验设计和数据分析。对于定量的数字PCR，请记住需要配合QX200系统使用。