伯乐CFX Opus96实时荧光定量PCR系统日常维护保养

伯乐（Bio-Rad）CFX Opus 96 实时荧光定量PCR系统是一款非常精密和可靠的仪器。为了确保其长期稳定运行、获得准确可靠的实验数据，日常的维护保养至关重要。以下是针对CFX Opus 96的详细日常维护保养指南，分为 每日/每次使用后、每周/定期 和 深度清洁 三个部分。

一、伯乐CFX Opus 96实时荧光定量PCR仪每日/每次使用后维护

这些步骤应在每次运行完PCR程序后执行，是预防污染和保持仪器性能的基础。

1、清洁样品槽模块

（1）目的： 防止残留的矿物油、蒸发冷凝物或偶然洒落的样品污染后续实验。

（2）步骤：

待仪器冷却至室温后，打开机盖。

使用无尘棉签或压缩空气。

（3）推荐方法： 用无菌水或70%乙醇浸湿无尘棉签（注意：不要过量滴液，以挤不出液体为宜），轻轻擦拭每个样品孔的底部和侧壁。然后换用干棉签擦干，或等待其自然蒸发。

（4）替代方法： 使用实验室专用的压缩空气罐，从各个角度吹扫样品孔，以去除灰尘和纤维。

注意： 严禁使用强酸、强碱、高浓度有机溶剂或粗糙的纸巾/布料擦拭，以免刮伤或腐蚀样品槽表面。

2、清洁仪器外壳和机盖

（1）目的： 保持外观整洁，防止外部污染物被带入仪器内部。

（2）步骤：

用柔软的湿布蘸取少量中性清洁剂或70%乙醇，擦拭仪器外壳、机盖（特别是内侧）和控制面板。

确保布只是微湿，切勿让任何液体流入仪器内部或缝隙中。

用干布擦干。

3、检查并清空废液槽

（1）目的： CFX Opus 96在运行时会有一个小风扇帮助散热，可能会在内部产生少量冷凝水，收集在废液槽中。

（2）步骤：

定期检查仪器后部或底部的废液槽（请参考用户手册确认具体位置）。

如果发现有液体，及时将其倒掉并清洁干净。

二、伯乐CFC Opus 96实时荧光定量PCR系统每周/定期维护

如果仪器使用频率很高，建议每周进行一次。

1、运行背景校正校准

（1）目的： 校准光学检测系统，确保所有通道（如FAM, HEX, ROX, Cy5等）的基线背景值准确。这对于低丰度基因的准确定量尤其重要。

（2）步骤：

在CFX Maestro软件中，找到“Instrument"或“Maintenance"选项卡。

选择运行“Background Calibration"或类似选项。

按照屏幕提示进行操作。注意： 运行校准时，样品槽必须是空的且保持清洁干燥。

建议每月至少执行一次，或在更换光源、进行重大维修后必须执行。

2、进行光学检验

（1）目的： 快速检查所有LED光源和检测器是否工作正常。

（2）步骤：

在软件维护菜单中，选择运行“Optical Test"。

仪器会快速扫描所有荧光通道。检查测试结果报告，确认所有通道均通过（PASS）。如果某个通道失败，请联系伯乐技术支持。

3、全面清洁和检查

执行一次比日常更的样品槽和外壳清洁。

检查电源线、数据线是否连接牢固，有无破损。

三、深度清洁与特殊情况处理

1、污染物洒落处理

（1）情况： 如果发生PCR反应液或染料洒落到样品孔中。

（2）措施：

立即停止当前运行的程序（如果正在运行）。

待仪器冷却后，立即用含10%漂白剂（次氯酸钠）的棉签进行初步擦拭，以降解DNA/RNA。

然后用70%乙醇棉签多次擦拭，以去除漂白剂残留和有机污染物。

最后用无菌水棉签擦拭，并用干棉签擦干。

严重污染时，可能需要运行多个空白PCR循环（只加水）以验证清洁效果。

2、使用去污染液

如果怀疑有气溶胶或扩增子污染，可以使用商业化的PCR去污染剂（如DNA-OFF™, DNA-Zap™等），按照产品说明书对样品槽和机盖内部进行处理。处理后务70%乙醇或无菌水清除去污染剂残留。

四、维护保养注意事项总结

1、安全重要性： 在进行任何清洁维护前，务必关闭仪器电源并拔掉电源插头（简单的日常外壳擦拭除外）。待加热模块冷却后再操作，以防烫伤。

2、温和清洁： 始终使用温和的清洁剂（70%乙醇、中性清洁剂）。避免使用丙酮、强酸、强碱等腐蚀性溶剂。

3、防止液体进入： 确保清洁工具（布、棉签）不会滴落液体到仪器内部。

4、使用正确耗材： 始终使用伯乐推荐或认证的96孔板/八联管和光学封板膜。不匹配的耗材可能导致传热不均、密封不严或荧光信号异常。

5、环境要求： 将仪器放置在稳固、水平、无震动的台面上。避免阳光直射、远离热源、强磁场和腐蚀性气体。保持环境清洁，湿度适宜。

6、定期校准： 严格遵守推荐的校准周期，这是保证数据准确性的核心。

7、记录： 建立维护日志，记录每次维护的日期、内容和发现的问题，便于追踪和故障排查。