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艾本德5430 R 是一款通量高、通用性强的紧凑型高速冷冻离心机,是高校生命科学、医学、化学等实验室处理常规至关键样本的仪器。它结合了高达30,000 x g的相对离心力、制冷系统和灵活的转子系统,能够满足绝大多数日常离心需求。以下是其典型的使用案例分类:
一、分子生物学实验
这是5430 R最核心的应用领域,几乎贯穿所有分子生物学实验流程。
1、质粒DNA提取
步骤: 在碱裂解法提取质粒的多个步骤中都需要离心。
使用场景:
菌体收集: 将过夜培养的菌液离心(~5,000-12,000 xg),沉淀细菌。
沉淀质粒DNA: 在加入乙醇或异丙醇后,高速离心(~12,000-15,000 xg)使质粒DNA成团沉淀。
优势: 制冷功能至关重要,可以防止实验过程中样本因产热而降解,确保质粒的完整性和得率。
2、总RNA/DNA提取
步骤: 使用TRIzol等试剂提取RNA时,在分相和沉淀RNA步骤需要高速冷冻离心。
使用场景:
相分离: 离心(~12,000 xg)使样品分层为有机相和水相。
RNA沉淀: 离心(~12,000 xg)沉淀RNA。
优势: RNA极易被RNA酶降解,而低温是抑制酶活的关键。 5430 R的精准温控(通常设置为4°C)是成功提取完整RNA的保障。
3、PCR产物纯化、酶切反应终止与沉淀
步骤: 在PCR反应后或酶切反应后,经常需要离心来快速收集液滴、沉淀核酸或回收纯化产物。
使用场景: 使用离心柱纯化试剂盒时,需要多次短时高速离心(~10,000-15,000 xg)来结合、清洗和洗脱DNA。
优势: 通量高,一次可以处理多达48个甚至更多的样本(使用合适的转子),非常适合高通量克隆筛选等实验。
二、细胞生物学与生物化学实验
1、细胞培养
步骤: 细胞传代、收集细胞或更换培养基。
使用场景:
细胞传代: 离心(~300-500 xg)沉淀细胞,去除旧的培养基,加入新的培养基重悬。
收集细胞: 用于后续的蛋白提取、RNA提取或流式分析。
优势: 温和的加速/减速曲线(例如,Soft加速/减速功能)可以保护脆弱的哺乳动物细胞不被损伤,保持细胞活性。
2、蛋白质样品制备
步骤: 从细胞或组织中提取蛋白质。
使用场景:
去除细胞碎片: 细胞裂解后,通过高速冷冻离心(~12,000-16,000 xg)去除不溶性细胞碎片和核物质,收集上清(总蛋白)。
沉淀蛋白质: 使用丙酮浓缩蛋白质。
优势: 低温离心是防止蛋白质变性和降解的必要条件。
三、 微生物学实验
1、细菌/酵母菌体收集
步骤: 浓缩大量培养的微生物,用于后续研究。
使用场景: 离心(~5,000-8,000 xg)收集对数生长期或稳定期的菌体,用于提取基因组DNA、质粒或代谢产物。
优势: 处理量大,可以使用大容量的角转子或吊篮转子。
2、去除培养基中的微生物
步骤: 无菌过滤前的预处理。
使用场景: 对于含有少量微生物的样品,可以先通过离心初步去除大部分菌体。
四、总结与核心优势
通过以上案例,我们可以总结出艾本德5430 R在高校实验室中如此受欢迎的原因:
1、功能全面: 覆盖了从低速的细胞离心到高速的核酸/蛋白沉淀,满足了绝大多数实验室的日常需求。
2、温控精准可靠: 制冷功能是处理对温度敏感的生物样本(如RNA、蛋白质、活细胞)的刚需,保证了实验结果的重复性和可靠性。
3、高通量与灵活性: 配备多种转子(角转子、水平转子、酶标板转子等),可以兼容从0.2 mL PCR管到50 mL锥形离心管、甚至酶标板等多种规格的样本,实现“一机多用"。
4、操作简便与安全: 直观的数字控制、快速制冷、Short-spin(瞬时离心)功能以及可靠的盖锁安全机制,使其成为一款用户友好且安全的设备。
总而言之,艾本德5430 R是高校实验室中处理常规但关键的生物样本制备任务的理想选择,其稳定性和通用性使其成为许多实验室公共平台上基础设备。