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赛默飞Qubit™ Flex荧光计的功能。这是一款非常受欢迎的专业型核酸和蛋白定量仪器,其核心优势在于高通量、高精度和专一的检测。简单来说,Qubit Flex荧光计主要用于对DNA、RNA、microRNA、蛋白质等生物分子进行精确定量。它无法像酶标仪那样进行复杂的细胞学或生化实验,但在定量方面,它比普通紫外分光光度计(如NanoDrop)更准确、更灵敏。
一、赛默飞QubitFlex荧光计核心功能:精确定量
与通过吸光度(A260)测算的仪器不同,Qubit Flex使用荧光染料技术,这些染料只与特定的目标分子(如双链DNA)结合并发光,因此几乎不受盐、溶剂、游离核苷酸或降解物(如单链核酸)的干扰,结果非常可靠。
1、核酸定量:
dsDNA (双链DNA):这是常用的功能,用于定量下一代测序(NGS)文库、PCR产物、质粒DNA、基因组DNA等。准确性对NGS文库的 pooling 至关重要。
ssDNA (单链DNA):定量用于测序的单链DNA文库。
RNA:定量用于转录组学分析(如RNA-Seq)、qRT-PCR的高质量RNA样品。
microRNA:专门定量低浓度的microRNA样品,这对于miRNA研究非常重要。
2、蛋白质定量:
使用特定的蛋白质荧光染料,精确定量溶液中的蛋白质浓度。这对于需要精确蛋白上样量的实验(如Western Blot、蛋白质色谱)非常有用。
二、Qubit Flex 的核心特点和优势
除了基础的定量功能,Qubit Flex之所以叫“Flex"(灵活),是因为它拥有以下突出特点:
1、高通量:
支持8联排管,一次最多可以检测8个样品,非常适合需要处理大量样品的实验室,如核心测序平台、基因检测公司等,大大提升了效率。
2、出色的灵敏度和检测范围:
灵敏度高,仅需1-20 μL的微量样品。
可以检测非常低浓度的样品(如低至10 pg/μL的DNA),这是普通紫外分光光度计无法做到的。
3、自动化与信息化:
大尺寸触摸屏界面,操作直观。
实验结果可以直接导出数据表或生成PDF报告,方便记录和追溯。
内置条形码扫描器,可以直接扫描样品管上的条码,将样品信息与检测数据自动关联,极大减少了人为错误,特别符合GLP/GMP实验室对数据完整性的要求。
4、预编程实验程序:
仪器内置了所有常用的检测程序(如dsDNA HS, RNA HS, Protein等),用户只需选择对应的 assay,仪器会自动设置好参数。
三、典型应用场景
1、下一代测序(NGS):在构建完测序文库后,必须对每个文库进行精确定量,以确保不同文库以等摩尔量混合进行上机测序。这是Qubit Flex最关键的应用场景。
2、荧光定量PCR(qPCR, dPCR):在运行qPCR实验前,精确测定模板DNA或cDNA的浓度,以确保上样量的准确性,获得可靠的Ct值。
3、蛋白质组学:在Western Blot、蛋白质纯化等实验前,精确测定蛋白质样品浓度。
4、质量控制(QC):作为实验室样品质量控制的环节,确保用于下游实验的样品在浓度上符合要求。
Qubit Flex荧光计是分子生物学和基因组学实验室中用于样品精确定量和质量控制的“黄金标准"仪器之一。 如果您的工作流程涉及大量需要精确浓度的核酸或蛋白质样品,那么Qubit Flex是一个非常理想的选择。