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技术文章

thermofisher赛默飞ST4台式通用高速离心机使用案例

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赛默飞ST4系列离心机(如 ST 4、ST 4R、ST 4R Plus)是实验室中非常经典和常见的一款微量高速离心机。它以其紧凑的设计、高速性能和多功能性而闻名,广泛应用于分子生物学、细胞生物学、生物化学等领域。


一、案例一:分子生物学 - 质粒DNA提取与PCR产物纯化

1、应用背景:

在分子克隆实验中,经常需要快速离心来收集、纯化微量的DNA样品,例如在碱裂解法提取质粒DNA的步骤中,或使用离心柱法纯化PCR产物时。

2、具体操作:

沉淀DNA: 在质粒提取过程中,加入异丙醇或乙醇沉淀DNA后,需要将DNA离心至管底。

纯化步骤: 在使用离心柱纯化试剂盒时,几乎所有步骤都离不开微量离心机:

结合: 将裂解液与结合缓冲液混合后,转移到离心柱中,12,000 rpm离心30-60秒,使DNA结合到膜上。

洗涤: 加入 wash buffer 后,同样以 12,000 rpm 离心 30-60秒,弃去废液。

洗脱: 最后加入洗脱液(Elution Buffer或水),MAX 转速(如13,000 rpm或14,000 rpm)离心60秒,将纯化的DNA收集到新的EP管中。

3、ST4的优势体现:

高速: MAX 转速可达15,000 rpm以上,能产生足够的离心力(>25,000 x g)确保微量液体中的DNA被甩下并紧密结合/洗脱。

快速启动/停止: 提速和降速都很快,非常适合这种短时、高频次的离心操作,极大提高了实验效率。

适配性: 标配的转子(如8x2.0mL固定角转)适配1.5mL/2.0mL EP管和常见的离心柱。


二、案例二:细胞生物学 - 细胞培养物的快速离心

1、应用背景:

在细胞传代、收集细胞或需要快速终止反应(如去除培养液中的药物)时,需要快速沉降细胞。

2、具体操作:

细胞传代: 将培养瓶中的细胞悬液转移到15mL离心管中,使用ST4配套的适配器(Adapter),可以容纳15mL和50mL锥形底离心管。

离心参数: 以 2,000 - 3,000 rpm 离心 3-5 分钟,使细胞形成坚实的沉淀。

收集上清或细胞: 离心后,可以轻松地倒掉或吸走上清培养基,留下细胞沉淀用于后续的重悬和传代。

3、ST4的优势体现:

通用性: 通过更换不同的转子和适配器,ST4可以处理从0.2mL PCR管到50mL锥形管的多种容器,实现“一机多用"。

Gentle模式(部分型号): 对于某些娇嫩的细胞,ST4R等型号提供的“Gentle"升/降速模式可以避免剧烈的加减速对细胞造成机械损伤。

节省空间: 相比于大型落地离心机,ST4体积小巧,可以轻松放入超净工作台或生物安全柜内,方便进行无菌操作。


三、案例三:生物化学 - 蛋白质沉淀与快速分离

1、应用背景:

在提取总蛋白或需要浓缩蛋白样品时,常用三(TCA)或丙酮沉淀蛋白质,随后需要高速离心来收集蛋白沉淀。

2、具体操作:

沉淀反应: 在细胞裂解液或蛋白样品中加入沉淀剂,冰浴反应一段时间。

离心收集: 将混合物转移到1.5mL EP管中,使用预冷(4°C)的ST4离心机,以 MAX 转速(14,000 rpm或更高)离心15-20分钟。

清洗: 弃去上清,加入预冷的丙酮清洗沉淀,再次高速离心。

溶解: 最后晾干沉淀,用适当的缓冲液重溶蛋白沉淀。

3、ST4的优势体现:

制冷功能(ST4R/Plus型号): 这是关键优势。ST4R和Plus型号带有制冷系统,可以在4°C下运行,有效防止离心过程中产热导致蛋白质变性或降解,对于温度敏感的生化实验至关重要。

高离心力: 能产生强大的离心力,确保微小的蛋白沉淀被紧密地压实到管底,方便去除上清。


四、总结:赛默飞ST4离心机的核心优势

1、高速与高离心力:MAX 转速可达15,200+ rpm,产生25,830 x g的RCF,能高效沉淀微量样品。

2、紧凑与通用性 :体积小巧,通过更换多种转子和适配器,可处理0.2mL至50mL的样品管。

3、温度控制(R/Plus) :制冷型号可在4°C下运行,保护温度敏感性样品。

4、操作简便与快速 :快速的加速/减速,预设程序、Short Spin按钮,大大提升工作效率。

5、安全与稳定:具备盖锁、转子识别、不平衡检测等安全功能,运行平稳,噪音低。

TEL:18016231680

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