thermo赛默飞NanoDropOne超微量光度计检测功能

NanoDrop One是一款功能强大、操作简便的微体积样品分析仪器，它革新了传统光度计需要比色皿的繁琐操作，仅需1-2 μL的样品即可完成快速、准确的测量。它集成了多种检测模式于一身，是分子生物学实验室得力工具。以下是其核心的检测功能：

一、赛默飞NanoDrop One 核酸定量

1、检测类型：双链DNA (dsDNA), 单链DNA (ssDNA), RNA, 寡核苷酸。

原理：利用核酸在260 nm波长处有吸收峰的特性（根据朗伯-比尔定律）进行定量。

2、关键指标：

浓度：直接给出样品浓度（ng/μL）。

纯度：通过计算吸光度比值来评估样品纯度：

A260/A280比值：用于评估蛋白质污染。理想值：~1.8 (DNA), ~2.0 (RNA)。比值偏低表明可能存在蛋白质污染。

A260/A230比值：用于评估盐类、胍盐、EDTA或碳水化合物等污染。理想值通常 >2.0。比值偏低表明存在有机溶剂或盐类残留。

3、优势：无需稀释，直接测量原始样品，快速（数秒出结果），节省珍贵样品。

二、赛默飞紫外-可见全光谱扫描

NanoDrop One可以生成190nm至840nm的完整光谱图，这对于样品鉴定和纯度评估至关重要。

应用：

1、鉴定未知样品：通过光谱形状判断是核酸、蛋白还是其他化合物。

2、深入评估纯度：全光谱可以揭示其他污染物（如苯酚、胍盐）的特征吸收峰，这些是260/280和260/230比值无法全面反映的。

3、检测颗粒物散射：光谱基线抬升通常意味着样品中存在不溶性颗粒或气泡。

三、蛋白质定量

NanoDrop One内置了多种常用的蛋白质定量方法（A280模式）。

1、检测原理：

A280直接检测：利用蛋白质中的色氨酸 (Trp) 和酪氨酸 (Tyr) 在280 nm处的吸收来定量。该方法需要已知消光系数。

比色法方法：仪器内置标准曲线，可用于：

微BCA法 (Micro BCA)：灵敏度高，抗去垢剂干扰能力强。

Bradford法：快速，但易受去垢剂干扰。

2、优势：与核酸一样，仅需微量样品即可快速获得浓度结果（mg/mL）。

四、赛默飞荧光定量

这是一个可选配的功能模块，大幅扩展了NanoDrop One的应用范围，特别是对低浓度样品的检测。

1、原理：使用特定的荧光染料，通过激发光激发染料发出荧光，检测荧光强度来定量，其灵敏度比紫外吸收法高几个数量级。

2、应用：

超低浓度核酸定量：如使用Quant-iT™ dsDNA HS 或 RNA HS assays，可检测低至 pg/μL 级别的核酸，适用于下一代测序 (NGS) 文库质检、单细胞分析等。

特异性检测：某些染料只对特定类型的核酸（如双链DNA）有强荧光信号，特异性更好。

五、赛默飞NanoDrop One的突出特点：

1、智能化与自动化：配备触摸屏和智能软件，可自动选择光程、保存光谱数据、生成报告。

2、样品留存：测量后的样品可以回收，用于下游实验。

3、快速高效：每个样品测量仅需几秒钟，无需清洗比色皿，极大提升了工作效率。

总而言之，赛默飞NanoDrop One不仅仅是一台核酸浓度仪，它是一个功能高度集成的微体积全光谱分析平台，能够满足现代生命科学实验室对样品质量控制的多样化需求。