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Qubit荧光计采用特定的荧光染料,这些染料会选择性地与不同种类的生物分子(DNA、RNA、蛋白等)结合,并发出荧光。其荧光强度与样品中靶分子的浓度成正比。因此,您必须使用赛默飞为Qubit系统开发的检测试剂盒,而不能使用其他品牌的荧光染料或传统紫外分光光度法所需的耗材。
一、必需试剂:检测试剂盒 (Assay Kits)
1、Qubit dsDNA HS (高灵敏度) Assay Kit (货号: Q32854)
用途: 用于低浓度双链DNA (dsDNA) 的精准定量,范围是0.2 ng/mL 至 100 ng/mL。这是常用的试剂盒,适用于下一代测序 (NGS) 文库、微量基因组DNA、ChIP-DNA等的定量。
包含: 缓冲液、染料、标准品#1和#2。
2、Qubit dsDNA BR (宽范围) Assay Kit (货号: Q32853)
用途: 用于较高浓度的双链DNA定量,范围是2 ng/mL 至 1000 ng/mL。适用于浓度较高的DNA样品,如质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。
3、Qubit RNA HS Assay Kit (货号: Q32852)
用途: 用于精准定量RNA,范围是5 ng/mL 至 100 ng/mL。可特异性识别RNA,不受DNA干扰。
4、Qubit RNA BR Assay Kit (货号: Q32855)
用途: 用于较高浓度的RNA定量,范围是20 ng/mL 至 1000 ng/mL。
5、Qubit Protein Assay Kit (货号: Q33211/Q33212)
用途: 用于蛋白质溶液的定量,范围是0.06 µg/mL 至 5 µg/mL (微孔板模式) 或 0.25 µg/mL 至 5 µg/mL (管式检测模式)。
6、其他专用试剂盒:
miRNA Assay Kit: 用于microRNA定量。
ssDNA Assay Kit: 用于单链DNA定量。
HR (高范围) Assay Kits: 用于浓度更高的特定样品。
二、必需耗材 (Consumables)
1、Qubit检测管 (Qubit Assay Tubes) (货号: Q32856)
描述: 这是专用的0.5 mL薄壁PCR管,光学特性经过优化,能确保读数准确。
重要性: 强烈建议使用原厂检测管。使用普通PCR管可能会由于管壁厚度和透光性不一致导致读数不准,甚至刮擦样品仓。
2、无粉手套
描述: 在配制工作液和操作样品时必须佩戴。手上的油脂、核酸酶或污染物会严重影响检测结果的准确性。
三、 辅助试剂与耗材
1、Qubit试管架 (Qubit Tube Rack) (货号: 货号可能随包装变化,通常试剂盒会附带一个)
描述: 一个黑色的塑料架,专门用于放置Qubit检测管,方便操作和避免管壁污染。
2、去离子水或TE缓冲液
用途: 用于稀释标准品和样品,以及作为空白对照。确保水质纯净,无核酸酶污染。
3、移液器及匹配的吸头
要求: 需要精确的移液器(如0.5-10 µL, 2-20 µL, 20-200 µL)和高质量、无污染、无RNase/DNase的吸头。准确的移液是保证结果可靠的关键。
4、擦拭纸
用途: 用于清洁溅出的液体或擦拭管壁。推荐使用无绒屑的实验室擦拭纸。
四、总结清单:
为了运行一次成功的Qubit检测,您需要准备:
1个 针对您目标分子的 Qubit检测试剂盒。
数支 Qubit专用检测管。
无粉手套。
纯净水/TE缓冲液。
精确的移液器和吸头。
建议始终访问赛默飞或咨询供应商,以获取新的产品货号和详细信息。