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使用Qubit 4.0荧光计(Thermo Fisher Scientific)相比传统的紫外分光光度计(如NanoDrop)或其他荧光定量方法,具有以下优势,适用于特定的实验需求:
一、高特异性和准确性
1、仅检测目标分子:Qubit使用荧光染料(如dsDNA HS/BR、RNA HS染料)特异性结合目标分子(如双链DNA、RNA或蛋白质),避免杂质干扰(如游离核苷酸、单链DNA、盐离子或蛋白质污染)。
对比NanoDrop:紫外吸收法(260 nm)会检测所有核酸(包括降解片段和污染物),导致浓度高估。
2、低检测限:
DNA检测范围:0.2–1000 pg/μL(高灵敏度模式),适合痕量样本(如单细胞测序、cfDNA、微量提取产物)。
蛋白质检测范围:0.05–5 mg/mL(Protein Assay)。
二、操作简便且快速
1、无需稀释:
直接测量1–20 μL原始样本,无需像紫外法那样多次稀释调整吸光度。
2、一键式操作:
触摸屏界面选择检测类型(如dsDNA、RNA、Protein),加载样本后3秒内出结果。
3、内置计算器:
自动计算试剂用量、检测范围,支持摩尔浓度转换和样本归一化。
三、适用于低浓度或复杂样本
1、荧光法的优势:
在以下场景比紫外法更可靠:
样本浓度极低(如微量DNA文库、环境DNA)。
样本中含污染物(如胍盐、酚、肝素)。
需要区分DNA和RNA(如RNA-seq前的质控)。
2、兼容多种试剂盒:
Qubit 4.0支持多种预优化试剂盒(如BR/HS染料),覆盖不同浓度需求。
四、数据管理和合规性
存储和导出:
可存储10,000组数据,支持USB/Wi-Fi导出,符合GLP/GMP要求。
21 CFR Part 11合规选项:
升级固件后支持电子签名和审计追踪(需SAE模式)。
五、何时选择Qubit 4.0?
1、需要高精度的核酸/蛋白质定量(如qPCR、NGS文库构建)。
2、样本浓度低或含污染物。
3、避免紫外法对降解核酸的误判。
若需更高通量,则选择Qubit Flex。两者核心检测原理一致,Flex在效率上更优。