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赛默飞(Thermo Scientific)Qubit 4.0 荧光计是一种高灵敏度的核酸/蛋白质定量仪器,其检测依赖于荧光染料与目标分子的特异性结合。使用原装检测管(Qubit Assay Tubes)是确保数据准确性和可靠性的关键因素,主要原因如下:
一、光学性能的精准校准
1、透光性优化:原装管采用特殊光学级透明塑料(如聚苯乙烯),确保荧光信号在特定波长(如~480 nm激发/~520 nm发射)下无背景干扰,避免因管壁散射或吸收导致信号偏差。
2、一致性:每批次原装管的厚度、材质均一,减少管间差异,保证重复实验的可比性。
二、尺寸与仪器的匹配
1、几何设计:Qubit 4.0的检测孔针对原装管(0.5 mL或1.5 mL规格)的直径、高度和底部弧度优化,确保样品处于最佳光路位置。非原装管可能因尺寸偏差导致荧光信号检测不准确(如信号强度波动±10%以上)。
2、适配性:原装管可直接插入仪器,无需额外调整,避免因管体倾斜或偏移引起的误差。
三、避免污染物干扰
1、无荧光背景:原装管经过特殊处理,不含荧光添加剂(如某些廉价离心管可能含有增塑剂或染料),防止假阳性信号。
2、低吸附表面:管壁经亲水涂层处理,减少核酸/蛋白质的非特异性吸附(尤其对低浓度样本至关重要)。
四、实验标准化与质控
1、认证要求:赛默飞的操作手册明确要求使用原装管,否则可能影响数据有效性(尤其在发表论文或临床检测中)。
2、质量控制:原装管通过严格的无菌、无DNase/RNase认证,避免样本降解风险。
五、成本与风险的权衡
1、看似昂贵,实则节省:非原装管可能导致数据异常,需重复实验,反而增加时间和样本成本。
2、风险案例:用户反馈显示,使用普通离心管可能导致:
低浓度样本(如<10 ng/μL DNA)定量结果偏高或偏低。
梯度稀释样本的线性关系(R²值)变差。
原装检测管是Qubit 4.0精准定量的核心耗材,尤其在低浓度样本、高灵敏度实验中不可替代。虽然成本较高,但能最大限度减少实验变量,确保数据可靠性。对于常规筛查或预算有限的情况,若选择第三方管,务必进行严格的性能验证。