Qubit4.0荧光计的DNA、RNA、蛋白质

Qubit 4.0荧光计是Thermo Fisher Scientific公司推出的一款高灵敏度、高特异性的定量仪器，专用于精确测量DNA、RNA、蛋白质等生物分子的浓度。以下是其核心特点和使用方法的总结：

一、适用检测类型

1、核酸定量

DNA：dsDNA（双链）、ssDNA（单链）、microRNA、小片段DNA（如NGS文库）。

RNA：总RNA、mRNA等。

灵敏度：可检测低至0.5 pg/μL（高灵敏度试剂）至100 ng/μL（宽范围试剂）。

二、蛋白质定量

兼容多种荧光染料（如Qubit Protein Assay Kit），适合低浓度样本（0.05–5 mg/mL）。

三、Qubit4.0荧光计核心优势

1、高特异性：荧光染料仅结合目标分子（如dsDNA），避免污染物（如盐、游离核苷酸）干扰。

2、高灵敏度：比紫外分光光度法（Nanodrop）更准确，尤其适用于低浓度或复杂样本。

3、操作简便：触摸屏界面，预置标准曲线，无需用户校准。

四、操作步骤

1、试剂准备

选择对应的检测试剂盒（如Qubit dsDNA HS Assay Kit）。

将荧光染料与缓冲液按比例混合，配制工作液。

2、标准品检测

使用试剂盒提供的标准品（通常2个浓度点）建立标准曲线。

3、样本检测

将1–20 μL样本与工作液混合，室温孵育2–5分钟。

插入Qubit 4.0，选择对应检测程序，读取浓度。

4、数据分析

仪器自动计算浓度，结果可直接导出或保存。

五、注意事项

1、样本体积：推荐使用1–20 μL，浓度需在试剂检测范围内。

2、避免污染：手套操作，防止RNase/DNase污染（核酸检测时）。

3、染料特异性：不同分子需匹配专用染料（如RNA检测不可用dsDNA染料）。

4、动态范围：超出范围时需稀释或换用宽范围试剂。