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Qubit 4.0荧光计 是赛默飞世尔科技(Thermo Fisher Scientific)推出的一款高灵敏度、高精度的荧光定量检测仪,主要用于核酸(DNA/RNA)和蛋白质的定量分析。相较于传统紫外分光光度计(如NanoDrop),Qubit采用荧光染料特异结合技术,可避免杂质(如盐、蛋白、溶剂等)的干扰,提供更准确的浓度测量,尤其适用于低浓度样本(如NGS文库、cfDNA、miRNA等)。
一、Qubit4.0产品特色
1、高灵敏度与准确性
检测范围:
DNA/RNA:0.1–1000 ng(Qubit dsDNA HS/BR Assay)
蛋白质:0.25–500 µg(Qubit Protein Assay)
荧光检测技术:仅检测目标分子(如双链DNA),排除游离核苷酸、单链DNA、RNA或杂蛋白的干扰。
2、快速检测
检测时间:≤5秒/样本(标准模式)。
样本体积:仅需1–20 µL(取决于检测试剂盒)。
3、用户友好设计
触摸屏操作:4.5英寸彩色触摸屏,界面直观。
自动计算功能:直接显示样本浓度(ng/µL或µg/mL),无需手动计算。
数据存储与导出:可存储1000组数据,支持USB导出(CSV格式)。
4、兼容多种检测试剂盒
常用试剂盒:
DNA检测:dsDNA HS/BR Assay(高灵敏度/宽范围)、ssDNA Assay。
RNA检测:RNA HS Assay。
蛋白质检测:Protein Assay。
其他:miRNA Assay、CRISPR Cas9 Assay等。
5、便携与低维护
体积小巧:尺寸约18 × 14 × 10 cm,适合实验室台面使用。
无需校准:出厂预校准,仅需定期空白校准(使用空白缓冲液)。
二、适用应用场景
1、分子生物学:NGS文库定量、PCR产物检测、质粒DNA定量。
2、细胞与蛋白质研究:蛋白浓度测定(如BCA法的补充)。
3、微量样本:cfDNA、外泌体RNA、单细胞测序样本。
4、质量控制:避免紫外法(A260/A280)对杂质敏感的问题。
三、操作流程(以DNA检测为例)
1、配制工作液:将Qubit试剂(如dsDNA HS)与缓冲液按比例混合。
2、加样:取190 µL工作液 + 10 µL样本,混匀后加入Qubit专用试管。
3、检测:选择对应检测程序(如“dsDNA HS"),插入试管读取数据。
四、注意事项
1、避免光漂白:荧光染料对光敏感,建议避光保存试剂。
2、样本纯度要求:虽抗干扰能力强,但污染物(如酚、胍盐)可能影响结果。
3、定期空白校准:更换试剂批次或长时间未使用时需重新校准。
Qubit 4.0是分子生物学实验室中微量核酸/蛋白定量的金标准之一,尤其适合对数据准确性要求高的应用(如NGS、qPCR等)。如需更高通量,可考虑升级版Qubit Flex(支持8联管检测)。