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赛默飞SimpliAmp梯度PCR系统的性能验证通常包括以下内容,以确保其符合制造商声明的技术指标并满足实验室的检测需求:
一、温度准确性验证
1、验证方法:使用经过校准的温度探头或NIST可溯源温度验证设备,测量PCR模块的实际温度与设定温度的偏差。
2、标准要求:温度准确度应≤±0.25°C(35–99.9°C)。
二、温度均一性验证
1、验证方法:在模块不同位置(如边缘、中心)放置温度探头,测量达到目标温度(如95°C)后30秒内的温度波动。
2、标准要求:温度一致性应<0.5°C(95°C时)。
三、升降温速率验证
1、验证方法:测试模块从低温(如25°C)升至高温(如95°C)的速率,以及反向降温速率。
2、标准要求:模块变温速率峰值应达4.0°C/s,样品变温速率峰值应达3°C/s。
四、梯度功能验证
1、验证方法:在梯度模式下,设置不同温度区间(如10°C梯度,分3个VeriFlex区域),验证各区域的温度是否符合设定值。
2、标准要求:梯度温度范围应可调(如10°C区间,5°C/区),确保不同区域温度准确。
五、程序运行稳定性验证
1、验证方法:运行标准PCR程序(如30个循环),观察仪器是否稳定执行,无异常中断。
2、断电恢复测试:验证断电后程序是否能自动恢复。
六、样本扩增效率验证
验证方法:使用标准DNA模板和引物,运行PCR程序,检测扩增产物(如凝胶电泳或qPCR分析),确保扩增效率符合预期。
性能验证应结合实验室的具体需求,通常在新仪器安装、重大维修或定期维护后进行。验证数据应记录并归档,以符合ISO 15189或