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在赛默飞QuantStudio 5实时荧光定量PCR实验中,完成当前步骤后,下一步取决于你实验的具体阶段。以下是常见实验流程及下一步操作建议:
一、已完成QuantStudio 5 PCR反应体系配制
1、将反应板/管放入QuantStudio 5仪器中,确保正确对齐。
2、在软件(QuantStudio Design & Analysis Software)中设置实验参数(如循环条件、荧光通道等)。
3、点击“运行实验"开始PCR扩增和数据采集。
二、QuantStudio 5 PCR运行已完成
1、数据分析:
检查扩增曲线(S形曲线是否正常)。
计算Ct值(用于定量分析)。
若使用SYBR Green,进行熔解曲线分析(检查扩增特异性)。
2、数据导出:
将结果保存为Excel、PDF或RDML格式(符合MIQE指南)。
三、数据分析已完成
仪器维护:
清洁反应模块(用无水乙醇擦拭孔位)。
检查光学系统是否污染(必要时校准)。
定期(每3-6个月)进行温控校准。
四、实验出现异常
1、排查问题:
检查荧光信号是否正常(可能需清洁光学模块)。
确认温度准确性(必要时校准)。
检查试剂是否降解或污染。
2、联系技术支持(如赛默飞售后服务)
五、长期维护建议
1、定期更新软件版本。
2、每1-2年由专业工程师进行全面检修。