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BioRad伯乐T100梯度PCR仪作为一款高性能的PCR设备,其运行需要以下耗材和试剂,具体分类如下:
一、核心耗材
1、PCR管/板
0.2mL薄壁PCR管:需与仪器适配(如BioRad推荐规格),确保热传导效率。
8联管或96孔PCR板:兼容T100的模块规格,注意是否需使用透明或半透明盖膜。
封板膜/ adhesive seals:用于96孔板密封,防止蒸发和污染。
2、离心管/吸头
微量移液器吸头(无核酸酶):用于试剂分装,避免交叉污染。
1.5mL离心管:配制主混合液(Master Mix)时使用。
二、必需试剂
1、PCR反应组分
DNA模板:待扩增的核酸样本。
引物(Primers):特异性引物对,设计需符合实验需求。
dNTPs:脱氧核苷酸三磷酸(dATP、dTTP、dCTP、dGTP),提供合成原料。
DNA聚合酶:如Taq酶、高保真酶(如BioRad的iProof™),需匹配实验类型(常规/高保真)。
MgCl₂溶液(若酶需要):部分聚合酶需额外添加镁离子。
缓冲液(Buffer):通常随酶提供,含pH稳定剂和盐离子。
2、添加剂(可选)
增强剂:如BSA、DMSO、甜菜碱(Betaine),用于复杂模板(如GC-rich序列)。
染料:如SYBR Green(qPCR时使用),若需实时监测扩增。
三、辅助耗材
1、清洁与维护
无水乙醇或异丙醇:清洁PCR仪热盖和模块。
无绒拭布:擦拭模块,避免残留。
去离子水:校准温度时可能需要(参考仪器手册)。
2、防污染工具
RNase/DNase-free离心管和吸头:防止核酸降解。
紫外线灯或核酸清除剂(如DNA-OFF™):处理潜在污染。
四、注意事项
1、兼容性验证:确保耗材(如PCR板)与T100的加热块规格匹配,避免热传导不均。
2、无核酸酶环境:所有耗材需为无核酸酶级别(如认证的PCR Clean产品)。
3、梯度PCR优化:若使用梯度功能,需验证不同退火温度对试剂的影响。