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赛默飞371 CO₂培养箱是一款高精度、多功能的培养箱，能够为细胞提供一个稳定、无污染的培养环境。操作步骤主要包括设备准备、参数设置、样品处理与摆放、运行监控以及实验结束后的处理等多个环节。以下是对这些步骤的详细阐述：
一、设备准备
1、安装与环境要求：将培养箱放置在平稳的台面上，避免振动，远离阳光直射、通风口或其他热源。室温应在 15°C 至 30°C 之间，湿度保持在 30%-70%，确保设备附近电源接地良好，使用稳定的电压。
2、设备检查：检查电源连接是否牢固，CO₂气瓶压力是否充足（通常需配备 99.5% 纯度以上的医疗级 CO₂），确保门封条完好无损，检查湿度盘内水量是否足够。
3、开机初始化：插入电源，开启主电源开关，等待显示屏启动，查看自检结果，确认温度、湿度和 CO₂浓度显示正常，无报警提示。
二、参数设置
1、温度设置：按操作界面上的 “温度" 设置按钮，输入目标温度值（如 37°C，适合大多数哺乳动物细胞培养），确认并保存，系统会自动调整至设定温度。
2、CO₂浓度设置：按操作界面上的 “CO₂浓度" 设置按钮，输入目标 CO₂浓度值（一般为 5%），确认并保存，设备开始调整内部 CO₂浓度，确保气体供应正常，观察浓度是否稳定。
3、湿度管理：加入适量去离子水或蒸馏水至湿度盘，避免使用自来水以防止水垢堆积。默认湿度一般保持在 90%-95% RH，无需手动调节。
4、校准：温度校准，根据标准温度计核实设备内实际温度是否与设定值一致；CO₂校准，定期使用校准气体（如 5% CO₂）检查和调整传感器。
三、样品处理与摆放
1、样品准备：
样品容器（如培养瓶、培养皿）需提前灭菌，确保样品无污染。
2、样品摆放：
将样品均匀放置在培养箱内的搁板上，避免过于密集。
保留足够的气流通道，以确保箱内温湿度和CO₂浓度均匀。
四、灭菌操作步骤
1、高温灭菌：
清空培养箱内部，移除所有实验样品、培养皿以及试剂瓶。
取出可拆卸的内部组件（如搁架、湿度水槽、CO₂传感器等），传感器通常不耐高温，必须取出或使用保护罩（根据具体型号说明）。
关闭CO₂钢瓶，断开连接。
在控制面板上选择“高温灭菌模式"或“Sterilization Cycle"，系统会默认设置至140°C，时间通常为12小时（包括升温、灭菌、降温三个阶段）。无需额外调整，直接确认运行。
灭菌程序结束后，培养箱会自动冷却至安全温度（通常在40°C以下），方可打开门。
冷却完成后，将拆卸的组件（湿度水槽、搁架、传感器等）重新安装回培养箱。
重新连接CO₂钢瓶，确保气体供应正常。
2、手动灭菌（如培养箱内部组件不耐高温）：
使用无腐蚀性的消毒剂（如70%乙醇或过氧化氢溶液）对内部进行清洁。
用无绒布擦拭培养箱内壁、门封条和搁架。
对湿度水槽单独浸泡消毒，并清洗。
如培养箱不自带紫外线灯，可使用外置UV灯进行灭菌。将紫外线灯放置于培养箱内部，保持门关闭，开启UV灯运行30分钟至1小时。
